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溶血對(duì)ELISA試劑盒檢測(cè)乙肝表面抗原影響的因素
更新時(shí)間:2014-07-24   點(diǎn)擊次數(shù):999次

    在臨床檢測(cè)中,常常遇到溶血的標(biāo)本。溶血對(duì)ELISA檢測(cè)乙肝表面抗原(HBsAg)究竟是否有影響,ELISA試劑盒我公司研究技術(shù)人員對(duì)標(biāo)本溶血的原因及其對(duì)ELISA檢測(cè)乙肝表面抗原的影響進(jìn)行簡(jiǎn)要的討論,隨著生命科學(xué)的發(fā)展,我公司將以全新的姿態(tài)展現(xiàn)在生物科技的行業(yè)中,公司將不斷加快產(chǎn)品的創(chuàng)新性,大力提高生物試劑的研發(fā)和銷售。

1 標(biāo)本溶血的原因

    溶血可分為體內(nèi)溶血和體外溶血。體外溶血可由物理因素(抽血時(shí)負(fù)壓過(guò)大、水浴溫渡過(guò)高、冰凍、振蕩等機(jī)械性破壞)、化學(xué)因素(血樣接觸表面活性劑)和代謝因素(如遺傳病引起紅細(xì)胞脆性增加)引起。在臨床上常見(jiàn)的引起標(biāo)本溶血的原因包括:因?yàn)椴∪藝?yán)峻脫水、低血容量休克等原因?qū)е麓┐屉y題造成的溶血;因?yàn)槌檠镁哔|(zhì)量分歧格如真空管負(fù)壓不夠或塑料試管質(zhì)量較差導(dǎo)致的溶血;用干燥管采血為了盡快分離血清用竹簽攪拌不當(dāng)引起的溶血等。體內(nèi)溶血可由物理因素(如人工心臟瓣膜或大血管手術(shù)后)、化學(xué)因素(如惡性瘧)和藥物毒性反應(yīng)等因素引起。 

2 標(biāo)本溶血對(duì)乙肝表面抗原檢測(cè)的影響

    在17例溶血標(biāo)本中,初檢的5例HBsAg陽(yáng)性標(biāo)本,經(jīng)重新抽血復(fù)檢后有2例仍為陽(yáng)性,另3例轉(zhuǎn)陰。20例HBsAg陰性和10例OD值在臨界值四周的樣本,溶血與對(duì)應(yīng)非溶血標(biāo)本OD值間差異沒(méi)有明顯性:10例HBsAg陽(yáng)性樣品,溶血標(biāo)本OD值顯著大于對(duì)應(yīng)非溶血標(biāo)本OD值。ELISA試劑盒以為是溶血導(dǎo)致了假陽(yáng)性的泛起。對(duì)20例HBsAg陰性和10例HBsAg陽(yáng)性病人的溶血和非溶血標(biāo)本包括10例OD值在臨界值四周的標(biāo)本進(jìn)行了對(duì)照,結(jié)果非溶血和溶血標(biāo)本的陰、陽(yáng)性結(jié)果*一致。 


    一些研究沒(méi)有發(fā)現(xiàn)標(biāo)本溶血對(duì)HBsAg檢測(cè)的影響。對(duì)HBˉsAg強(qiáng)陽(yáng)性樣品的非溶血與溶血(Hb濃度為241g/L)標(biāo)本的A值作了對(duì)照后未發(fā)現(xiàn)兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,得出結(jié)論:溶血對(duì)HBsAg的檢測(cè)沒(méi)有影響(嚴(yán)格意義上應(yīng)表述為:溶血對(duì)HBsAg強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)沒(méi)有影響)。

3 標(biāo)本溶血對(duì)乙肝表面抗原檢測(cè)影響的可能機(jī)制

    溶血對(duì)ELISA試劑盒的影響主要是反應(yīng)孔對(duì)溶血血清中Hb的非特異性吸附和溶血時(shí)細(xì)胞內(nèi)液對(duì)血清的稀釋作用,溶血是因?yàn)楦鞣N原因造成紅細(xì)胞破壞,胞內(nèi)血紅蛋白(Hb)等物質(zhì)和細(xì)胞內(nèi)液進(jìn)入血清。Hb具有類過(guò)氧化物酶活性,其作用與辣根過(guò)氧化物酶類似,假如反應(yīng)孔非特異吸附Hb而殘留,則可催化底物顯色,使本底A值升高甚至造成假陽(yáng)性。ELISA試劑盒總之,溶血對(duì)ELISA檢測(cè)HBsAg有一定的影響,影響的性質(zhì)及其大小因所使用的試劑、測(cè)定方法、標(biāo)本HBsAg的有無(wú)及濃度高低、洗板的質(zhì)量好壞而異。 

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